Blot (biología)
A Blot, en biología molecular y genética, es un método de transferencia de proteínas, DNA o RNA, sobre un portador (por ejemplo, un nitrocelulosa PVDF o nylon membrana). En muchos casos, esto se hace después de un electroforesis en gel de, transferencia de las moléculas de la gel sobre la membrana Blot y otras veces añadiendo las muestras directamente en la membrana. Después del secado, transferido de las proteínas, DNA o RNA entonces son visualizadas por tinción colorante (por ejemplo, plata tinción de proteínas), autorradiográfica visualización de moléculas marcadas radiactivas (realizadas antes de la mancha), o etiquetado específico de algunas proteínas o ácidos nucleicos. Este último se realiza con anticuerpos o sondas de hibridación que se unen sólo a algunas moléculas de la mancha y tiene un enzima se unió a ellos. Después de adecuado lavado, esta actividad enzimática (y por lo tanto, las moléculas que buscamos en el blot) es visualizados por la incubación con adecuada reactiva, haciendo un depósito de color en el blot o una quimioluminiscencia reacción que es registrada por fotográfico película.
Contenido
- 1 Mancha blanca /negra meridional
- 2 Southwestern blot
- 3 Otras lacras
- 4 Véase también
- 5 Referencias
Mancha blanca /negra meridional
A Mancha blanca /negra meridional es un método habitualmente utilizado en biología molecular para la detección de una específicos DNA secuencia de muestras de ADN. Southern blot combina la transferencia de fragmentos de ADN separados por electroforesis a una membrana de filtro y detección del fragmento posterior por el hibridación de la sonda.[1]
Southwestern blot
A Southwestern blot se basa en Borrar meridional y se utiliza para identificar y caracterizar proteínas de unión a ADN por su capacidad para enlazar con las puntas de prueba específicas del oligonucleótido.[2] Las proteínas se separan por electroforesis en gel de y posteriormente son transferidas a membranas de nitrocelulosa similares a otros tipos de borrar.
Otras lacras
- Mancha blanca /negra norteña para RNA
- Northern blot reverso para RNA
- Western blot para proteínas
- Far-Western blot para proteínas
- Borrar este para modificación postraduccional
- Blot del lejano Oriente para Lípidos, Drogas y Hormonas
- Blot dot
- Blot de ranura
Véase también
- Immunoscreening
Referencias
- ^ Dr. Towbin et al.; Staehelin, T; Gordon, J (1979). "Transferencia electroforética de proteínas de geles de poliacrilamida a hojas de nitrocelulosa: procedimiento y algunas aplicaciones". PNAS 76 (9): 4350. doi:10.1073/pnas.76.9.4350. PMID 388439.
- ^ B Bowen, Steinberg J, Laemmli UK, Weintraub H (enero de 1980). "La detección de ADN-proteínas por proteínas borrar". Ácidos nucleic Res. 8 (1): 1 – 20. doi:10.1093/Nar/8.1.1. PMC327239. PMID6243775.