Histología

Este artículo está sobre la histología o anatomía microscópica. Anatomía general, consulte Anatomía.

No debe confundirse con Historiografía.

Un espécimen histológico teñido, colocado entre un cristal portaobjetos de microscopio y cubreobjetos de, montado en el escenario de un microscopio de luz.

Espécimen histológico por microscopía de luz.
1 portaobjetos, 2 cubreobjetos, 3 sección de tejido manchado entre 1 y 2

Vista microscópica de un espécimen histológico de humanos pulmón tejidos teñidos con hematoxilina y eosina.

Histología (compuesto de los Griego palabras: HISTÓS histos "tejido" y -CIENCIA -logia 'ciencia') es el estudio de la anatomía microscópica de células de y tejidos de plantas y animales. Comúnmente se realiza mediante el examen de células y tejidos bajo un microscopio de luz o microscopio electrónico de, que han sido seccionadas, teñidos y montados sobre un portaobjetos de microscopio. Los estudios histológicos pueden ser efectuados por el cultivo de tejidos, donde vivas células humanas o animales son aisladas y mantenidas en un ambiente artificial para diversos proyectos de investigación. La capacidad de visualizar o identificar diferencialmente estructuras microscópicas con frecuencia se ve reforzada mediante el uso de manchas histológicas. La histología es una herramienta esencial de Biología y medicina.

Histopatología, el estudio microscópico de tejido enfermo, es una herramienta importante en anatomía patológica, desde un diagnóstico preciso de cáncer y otras enfermedades por lo general requiere la examinación histopatológica de las muestras. Médicos capacitados, con frecuencia con licencia patólogos, son el personal que realiza el examen histopatológico y proporciona información de diagnóstico en base a sus observaciones. El personal capacitado que preparan a las muestras histológicas para el examen histotechnicians, técnicos de histología (HT), tecnólogos de histología (HTL), los científicos médicos, técnicos de laboratorio médico, o científicos biomédicos. Su campo de estudio se llama histotecnología.

Preparación de la muestra

Estudiantes de medicina (EMIS) obtener muestras de un estómago humano para futuros estudios histológicos en 2012 en el Instituto Nacional de Cardiologia en Mexico

De fijación

Fijación química con formaldehído u otros productos químicos

Artículo principal: Fijación (histología)

Fijadores químicos son utilizados para preservar el tejido de la degradación y para mantener la estructura de la célula y de los componentes celulares como organelos de la célula (por ejemplo, núcleo, retículo endoplásmicomitocondrias). El fijador más común para la microscopia ligera es neutro tamponada de formalina al 10% (4% formaldehído en tamponada fosfato salino). Para microscopía electrónica, el fijador más utilizado es glutaraldehído al, generalmente como una solución al 2.5% en tamponada fosfato salino. Estos fijadores conservan tejidos o células principalmente irreversiblemente Cross-linking de las proteínas. La acción principal de estos fijadores del aldehído es reticular grupos amino de las proteínas mediante la formación de puentes de metileno (-CH₂-), en el caso del formaldehído, o por un C5H10 enlaces cruzados en el caso del glutaraldehído. Este proceso, conservando la integridad estructural de las células y tejidos puede dañar la funcionalidad biológica de las proteínas, particularmente enzimasy también puede desnaturalizar ellos hasta cierto punto. Esto puede ser perjudicial para determinadas técnicas histológicas. Fijadores más a menudo se utilizan para microscopía electrónica tales como tetróxido de osmio o acetato de uranilo

La fijación con formol conduce a la degradación del mRNA, miRNA y ADN en tejidos. Sin embargo, la extracción, amplificación y análisis de estos ácidos nucleicos de tejidos formalina-fijos, parafina-encajado es posible utilizando protocolos apropiados.

Fijación de la sección congelada

Procedimiento de la sección congelada se llama de una manera rápida de arreglar y montar secciones de histología utilizando un dispositivo de refrigeración una criostato. A menudo se utiliza después de la extirpación quirúrgica de tumores para permitir la rápida determinación de margen (que el tumor ha sido completamente removido).

Procesamiento - deshidratación, claro y la infiltración

El objetivo del proceso de tejido es eliminar el agua de los tejidos y reemplazar con un medio que se solidifica para permitir que las secciones finas cortar. Tejido biológico debe ser apoyado en una matriz dura para permitir que secciones lo suficientemente delgadas a cortar, por lo general de 5 μm (micrómetros; 1000 micras = 1 mm) grueso para microscopía de luz y 80-100 nm (nanómetro; 1.000.000 nanómetros = 1 mm) grueso para microscopía electrónica. Para microscopía de luz, cera de parafina se utiliza más frecuentemente. Puesto que es inmiscible con el agua, el principal constituyente del tejido biológico, debe retirar primero agua en el proceso de deshidratación. Las muestras se transfieren a través de baños de progresivamente más concentrados etanol para eliminar el agua. Esto es seguido por un agente hidrofóbico claro (tales como xileno) para eliminar el alcohol y finalmente fundido cera de parafina, el agente de infiltración, que sustituye el xileno. Cera de parafina no proporciona una matriz lo suficientemente dura para cortar secciones muy delgadas para microscopía electrónica. En cambio, se utilizan resinas. Resinas epoxi se emplean lo más comúnmente posible medio de inclusión, sino resinas acrílicas también se utilizan, particularmente donde Immunohistochemistry se requiere. También se pueden cortar secciones gruesas (0.35μm a 5μm) de tejido embebido en resina para microscopía. Una vez más, la inmiscibilidad de epoxi y resinas de acrílico con agua requiere el uso de la deshidratación, generalmente con etanol.

Incrustación de

Incrustación de OCT (Temperatura óptima de corte compuesto)

Después de que los tejidos han sido deshidratados despejados e infiltrado con el material de empotrar, están listos para incrustar externos. Durante este proceso las muestras de tejido son colocadas en moldes junto con líquido incorporar material (como agar, gelatina o cera) que luego se endurece. Esto se consigue por enfriamiento en el caso de la cera de parafina y de calefacción (curado) en el caso de las resinas de epoxy. Las resinas acrílicas son polimerizadas por calor, luz ultravioleta o por catalizadores químicos. Los bloques endurecidos que contienen las muestras de tejido son entonces listos para ser seccionados.

Porque formalina-fijos, parafina-encajado de los tejidos (FFPE) pueden ser almacenados indefinidamente a temperatura ambiente, y los ácidos nucleicos (ADN y ARN) puede ser recuperados de ellas décadas después de la fijación, tejidos FFPE son un recurso importante para los estudios históricos en la medicina.

Inclusión también puede lograrse mediante tejido congelado, no fijos en un medio a base de agua. Los tejidos previamente congelados se colocan en moldes con el líquido de incrustación de material, generalmente una base de agua glicol, OCT, TBS, Cryogel o resina, que luego se congela para formar endurecido bloques.

De seccionamiento

Artículo principal: Para Microtomo

Un ultramicrótomo de Leica

Para microscopía de luz, un cuchillo de acero montado en un microtomo se utiliza para cortar 4-Micrómetro-secciones de tejido grueso que se montan en un vaso portaobjetos de microscopio. Microscopía electrónica de transmisión, un cuchillo del diamante montado en un ultramicrótomo se utiliza para cortar 50-nanómetro-secciones de tejido grueso que se montan en una rejilla de cobre de 3 milímetros de diámetro. Las secciones montadas son tratadas con el apropiado de la mancha.

Las secciones se pueden cortar a través del tejido en un número de direcciones. Para la evaluación patológica de los tejidos, de seccionamiento vertical, (perpendicular a la superficie del tejido para producir una sección transversal del corte) es el método habitual. Horizontal (también conocido como transversal o longitudinal) de seccionamiento, corte a lo largo del eje largo del tejido, se utiliza a menudo en la evaluación de los folículos pilosos y unidades pilosebáceas. Tangencial a la horizontal de seccionamiento se utiliza en Cirugía de Mohs y en los métodos de CCPDMA.

Cryosectioning

Artículo principal: Procedimiento de la sección congelada

Tejido fijo o interpretaciones puede ser congelado y cortado usando un micrótomo montado en un dispositivo de refrigeración conocido como un criostato. Las secciones congeladas están montadas en un portaobjetos de vidrio y pueden teñirse para realzar el contraste entre diferentes tejidos. Interpretaciones de secciones congeladas también pueden utilizarse para estudios que requieren la localización de la enzima en las células y tejidos. Es necesario fijar tejido para determinados procedimientos tales como anticuerpo ligado inmunofluorescencia de tinción. Sección congelada puede utilizarse también para determinar si un tumor es maligno, cuando se encuentra casualmente durante la cirugía en un paciente.

Muestra de una tráquea coloreado con hematoxilina y eosina

La coloración

Artículo principal: La coloración

Ejemplo de tinción en microscopía óptica: Carmín tinción de una monogenean (gusano parásito)

Tejido biológico tiene poco contraste inherente en la luz o en microscopio electrónico. Tinción se emplea para dar tanto contraste del tejido así como resaltar particularidades de interés. Donde se entiende la química mecanicista subyacente de la coloración, el término histoquímica de la se utiliza. Hematoxilina y eosina (Tinción H & E) es la tinción microscópica luz más utilizada en histología e histopatología. Hematoxilina, un básico tinte, manchas núcleos azul debido a una afinidad con los ácidos nucleicos en el núcleo celular; eosina, un ácido las manchas del tinte, la citoplasma color de rosa. Uranilo acetato, citrato de plomo se usan para dar contraste al tejido en el microscopio electrónico.

Hay muchas otras técnicas de tinción que se han utilizado para manchar selectivamente las células y componentes celulares. Una de estas técnicas consiste en tumores periféricos de la marca o márgenes quirúrgicos, en el que un determinado color de tinte se aplica a la frontera posterior de una muestra, otra a la anterior, etc., así que uno pueden identificar la ubicación de un tumor u otra patología dentro de un espécimen. Otros compuestos utilizados para las secciones de tejido de color incluyen Safranina, Aceite rojo O, Rojo de Congo, Verde rápido FCF, sales de plata y numerosos naturales y artificiales colorantes que generalmente se originaron en el desarrollo de colorantes para la industria textil.

Histoquímica de la se refiere a la ciencia de utilizar las reacciones químicas entre los componentes dentro del tejido y productos químicos de laboratorio. Una técnica histoquímica comúnmente realizada es el Perls Azul de Prusia reacción, usada para demostrar depósitos del hierro en enfermedades como la hemocromatosis.

Muestras de histología se han examinado a menudo por técnicas radiactivas. En historadiography, una diapositiva (a veces histochemically manchada) es una radiografía. Más comúnmente, autorradiografía se utiliza para visualizar las ubicaciones para que una sustancia radiactiva ha sido transportada dentro del cuerpo, como las células en Fase S (sometidos a Replicación del ADN) que incorporan tritiated timidina, o sitios que radiactiva ácido nucleico atar las puntas de prueba en hibridación in situ. Para autorradiografía a nivel microscópico, la diapositiva se sumerge típicamente en emulsión líquida zona nuclear, que se seca para formar la película de la exposición. Granos de plata individuales en la película se visualizan con microscopio de campo oscuro.

Recientemente, anticuerpos se han utilizado para visualizar específicamente las proteínas, carbohidratos y lípidos. Este proceso se denomina Immunohistochemistry, o cuando la mancha es un fluorescente molécula, inmunofluorescencia. Esta técnica ha aumentado grandemente la capacidad de identificar categorías de células debajo de un microscopio. Otras técnicas, avanzadas tales como no radiactivo in situ hibridación, puede combinarse con inmunoquímica para identificar moléculas de DNA o RNA específicas con sondas fluorescentes o etiquetas que pueden usarse para inmunofluorescencia y enzima-ligado de la fluorescencia amplificación (especialmente fosfatasa alcalina y amplificación de la señal tyramide). Microscopía de fluorescencia y microscopía confocal se utilizan para detectar señales fluorescentes con buen detalle intracelular. Cámaras digitales cada vez más se utilizan para capturar imágenes histológicas e histopatológicas

Manchas comunes del laboratorio

De la mancha	Uso común	Núcleo	Citoplasmas	Glóbulos rojos (gr)	Fibras de colágeno	Específicamente las manchas
Haematoxylin	General la coloración cuando se combina con eosina (es decir, H & E)	Naranja, azul Cyan o verde	Azul/marrón/negro	N / A	N / A	Los ácidos nucleicos — azul ER (retículo endoplasmático) — azul
Eosina	General la coloración cuando se combina con Hematoxilinas (es decir, H & E)	N / A	Color de rosa	Naranja y rojo	Color de rosa	Fibras elásticas — rosa Las fibras de colágeno, rosa Fibras reticulares: rosa
Azul de toluidina	La coloración general	Azul	Azul	Azul	Azul	Los gránulos de las células de mástil, púrpura
Tricrómico de Masson	Tejido conectivo	Negro	Rojo/color de rosa	Rojo	Azul/verde	Cartílago: azul/verde Fibras musculares: rojas
Tricrómico de Mallory	Tejido conectivo	Rojo	Rojo pálido	Naranja	Azul profundo	Queratina: naranja Cartílago: azul Matriz ósea: azul profundo Fibras musculares: rojas
Tinción elástica Weigert	Fibras elásticas	Azul/negro	N / A	N / A	N / A	Fibras elásticas: azul/negro
Tinción tricrómica de AZAN de Heidenhain	Distinguir las células de componentes extracelulares	Rojo/púrpura	Color de rosa	Rojo	Azul	Fibras musculares: rojas Cartílago: azul Matriz ósea: azul
Tinción de plata	Fibras reticulares, fibras nerviosas, hongos	N / A	N / A	N / A	N / A	Fibras reticulares: marrón/negro Fibras nerviosas: marrón/negro Hongos: negro
Tinción de Wright	Células de la sangre	Color azulado/morado	Gris azulado	Rojo/color de rosa	N / A	Gránulos neutrófilos — púrpura/color de rosa Gránulos eosinófilos, rojo naranja Gránulos basófilos: púrpura/violeta profundo Gránulos de la plaqueta, color rojo/morado
Tinción de orceína	Fibras elásticas	Azul profundo	N / A	Color rojo brillante	Color de rosa	Fibras elásticas: marrón oscuro Los gránulos de las células de mástil, púrpura Músculo liso: azul claro
Ácido peryódico de Schiff (PAS)	Membrana del sótano, localización de carbohidratos	Azul	N / A	N / A	Color de rosa	Glucógeno y otros carbohidratos, magenta

Mesa procedente de Michael H. Ross, Wojciech Pawlina, (2006). Histología: Un texto y Atlas. Hagerstown, MD: Lippincott Williams & Wilkins. ISBN0-7817-5056-3.

El Método de Nissl y Método de Golgi son útiles en la identificación de neuronas.

Técnicas alternativas

Incrustación de plástico se utiliza comúnmente en la preparación de material para microscopía electrónica. Los tejidos están incrustados en epoxy resina. Secciones muy finas (menos de 0,1 micrómetro) se cortan con cuchillas de diamante o cristal. Las secciones están manchadas con manchas densas del electrón (uranio y plomo) por lo que pueden ser vistos con el microscopio electrónico de.

Historia

Santiago Ramón y Cajal en su laboratorio

En el siglo XIX, la histología era una disciplina académica en la su propia derecha. El 1906 Premio Nobel de en fisiología o medicina fue concedida a histólogos Camillo Golgi y Santiago Ramón y Cajal. Tuvieron duelo de interpretaciones de la estructura neuronal del cerebro basado en diferentes interpretaciones de las mismas imágenes. Cajal ganó el premio por su teoría correcta y Golgi para la técnica de tinción que inventó para que sea posible.

Clasificación histológica de los tejidos animales

Hay cuatro tipos básicos de tejidos: tejido muscular, tejido nervioso, tejido conectivo, y tejido epitelial. Todos los tipos de tejido son subtipos de estos cuatro tipos de tejidos básicos (por ejemplo, las células se clasifican como tejido fino conectivo, puesto que generalmente se originan en la médula ósea de la sangre).

• Epitelio:: el revestimiento de las glándulas, intestino, piel y algunos órganos como el hígado, pulmón y riñón
• Endotelio:: el revestimiento de los vasos sanguíneos y linfáticos
• Mesotelio:: el revestimiento de los espacios pleurales y pericárdicos
• Mesénquima:: las células llenando los espacios entre los órganos, incluyendo las células de grasa, músculo, hueso, cartílago y tendones
• Células de la sangre:: las células sanguíneas rojas y blancas, las que se encuentran en los ganglios linfáticos y el bazo incluyendo
• Neuronas:: cualquiera de las células de conducción del sistema nervioso
• Células germinales:: reproducción de las células ()espermatozoides en los hombres, ovocitos en las mujeres)
• Placenta:: un órgano característico de mamíferos verdaderos durante el embarazo, uniéndose a madre y crías, proporcionando secreción endocrina y el intercambio selectivo de solubles, pero sustancias no partículas, transmitidas por la sangre a través de una aposición de uterino y trophoblastic vascularised piezas
• Células madre:: las células con la capacidad de convertirse en diferentes tipos de células

Tenga en cuenta que los tejidos de plantas, hongos y microorganismos también pueden examinarse histológicamente. Su estructura es muy diferente de los tejidos animales.

Ciencias afines

• Biología de la célula es el estudio de células vivas, su ADN y ARN y las proteínas que expresan.
• Anatomía es el estudio de órganos visible por el ojo desnudo.
• Morfología estudios de organismos enteros.
• Citología de la es el estudio microscópico de células sueltas o grupos obtenidos de secreciones corporales, aspiraciones, raspones, golpes o lavados.

Artefactos

Los artefactos son estructuras o características en el tejido que interfieren con la examinación histológica normal. Estos no siempre están presentes en el tejido normal y pueden provenir de fuentes externas. Artefactos interfieren con la histología cambiando el aspecto de los tejidos y ocultando las estructuras. Estos pueden dividirse en dos categorías:

La histología

Estas son las características y estructuras que han sido introducidas antes de la recogida de los tejidos. Un ejemplo común de éstos incluye: tinta de los tatuajes y las pecas (melanina) en muestras de piel.

Post-histología

Artefactos pueden resultar del proceso de tejido. Proceso comúnmente conduce a cambios como la contracción, lavado de los componentes celulares, los cambios en tipos de diferentes tejidos y alteraciones de las estructuras en el tejido de color. Porque estos son causados en un laboratorio puede evitarse la mayoría de los artefactos de la histología post o quitada después de ser descubierto. Un ejemplo común es pigmento del mercurio a la izquierda después de usar Fijador de Zenker para fijar una sección.

Arte de histología

Patrones normales de los tejidos y artefactos resultantes del proceso de preparación de tejido Asegúrese de que cada sección histológica es única. Como una obra de arte biológica estas imágenes proporcionan una visión profunda de la organización y función de nuestros cuerpos. Patrones histológicos como objetos cotidianos o características que están surgiendo en las comunidades sociales y científicas e incluso en artículos de revistas de la histopatología. La histología es un área de la ciencia donde el arte y la ciencia chocan. Demuestra que la histología puede ser apreciada por el patólogo a los detalles, sino también el arte amoroso una persona llana y realiza la histología y la patología más accesible y menos intimidante como una ciencia compleja.

Véase también

• Anatomía patológica
• Análisis de imagen automatizado del tejido
• Manchas biológicas
• Geoffrey Bourne
• Anatomía macroscópica
• Red cooperativa de tejidos humanos (CHTN)
• Patología digital
• Arturo Worth jamón
• Histopatología
• Publicaciones importantes en histología (Arturo Worth jamón y David H. Cormack's Histologíapor ejemplo)
• Captura de microdisección por láser
• Patología

Notas de la

1. Fuente de Merck (2002). Diccionario médico de Dorland. Obtenido de 2005-01-26.
2. Diccionarios médicos de Stedman (2005). Diccionario médico en línea de Stedman. Obtenido de 2005-01-26.
3. 4.000 imágenes de histología online (2007). (https://Histology-online.com)

Enlaces externos

Recursos de la biblioteca Acerca de Histología

Recursos en su biblioteca

• Histología de Meyer - un curso de histología online completa
• HistoNet 2000 - Atlas interactivo en línea
• Histología-online
• Protocolos de histología
• Atlas de histología y más
• Histoweb
• Histología de SIU SOM
• Atlas visual de la histología
• Glosario de histología
• Grupo de la histología de Victoria incorporado
• Fotomicrografías de la histología
• Slidebox virtual
• Histología azul

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