Microscopía de contraste de fase cuantitativa

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Microscopio de contraste de fase cuantitativa
Un microscopio de contraste de fase cuantitativo las células cultivadas en una diapositiva de imágenes basado en recipiente de cultivo celular.
Siglas QPCM
Otros nombres Microscopio de fase, microscopio de fase cuantitativa
Utiliza Observación microscópica y cuantificación de material biológico sin mancha
Artículos relacionados Microscopía de contraste de fase, Microscopía de contraste de interferencia diferencial, Microscopía de contraste Hoffman modulación, Ptychography

Microscopía de contraste de fase cuantitativa es el nombre colectivo para un grupo de métodos de microscopia que cuantifican la desplazamiento de fase se produce cuando las ondas de luz pasan a través de un objeto ópticamente más denso.

Figura 1:: En esta fase cambio de imagen de las células en cultivo, la altura y el color de un punto de la imagen corresponden al desplazamiento de fase medido. El desplazamiento de fase inducido por un objeto en un punto de la imagen depende solamente de grosor del objeto y la relativa Índice de refracción del objeto en el punto de la imagen. Por lo tanto se puede determinar el volumen de un objeto desde una imagen de cambio de fase cuando la diferencia en Índice de refracción entre el objeto y el medio circundante se conoce. [1]

Objetos translúcidos, como una célula humana viva, absorben y dispersan pequeñas cantidades de luz. Esto hace difícil de observar en microscopios ópticos ordinarios objetos translúcidos. Estos objetos, sin embargo, inducir un cambio de fase que puede ser observado usando un microscopio de contraste de fase. Contraste de fase convencional microscopía y métodos relacionados, tales como Microscopía de contraste de interferencia diferencial, visualizar cambios de fase mediante la transformación de gradientes de desplazamiento de fase en las variaciones de intensidad. Estas variaciones de intensidad se mezclan con otras variaciones de intensidad, lo que hace difícil extraer información cuantitativa.[2][3]

Métodos de contraste de fase cuantitativa se distinguen de otros métodos de contraste de fase en que crea un segundo supuesto imagen de cambio de fase o imagen de fase, independiente de la intensidad (campo brillante) imagen. Desenvolver la fase métodos se aplican generalmente a la imagen de cambio de fase para dar los valores de cambio de fase absoluta en cada píxel, como ejemplificado por figura 1.

Los principales métodos para medir y visualizar los cambios de fase son ptychography[4] y varios tipos de métodos de microscopia olográfica tales como microscopia holográfica digital, microscopia de interferencia olográfico y microscopia holográfica de digital en línea.[5] Común a estos métodos es que una patrón de interferencia (holograma) es registrado por un digital sensor de imagen. Desde el patrón de interferencia grabados, la intensidad y la imagen de cambio de fase numéricamente es creado por un equipo algoritmo de.[6]

Microscopía de contraste de fase convencional se utiliza principalmente para observar células vivas sin mancha.[7] Contrario a imágenes de contraste de fase convencional, imágenes de cambio de fase de las células vivas son adecuados para ser procesado por software de análisis de imagen. Esto ha conducido al desarrollo de la proyección de imagen no invasiva de células vivas y automatizado cultivo de células sistemas de análisis basados en la microscopía de contraste de fase cuantitativa.[5][8][9][10]

Véase también

  • Citometría de
  • Microscopia holográfica digital
  • Microscopia de interferencia olográfico
  • Imágenes de células vivas
  • Microscopía de contraste de fase
  • Ptychography

Enlaces externos

  • Fase shift Time-lapse de la microscopia video de una división de la célula triploide
  • Identificación de células con microscopia holográfica 3D computacional

Referencias

  1. ^ Manuel Kemmler; Markus Fratz, Dominik Giel, Norbert Saum, Albrecht de Brandenburg y Christian Hoffmann (2007). "No invasiva time-dependent citometría de control por holografía digital". J. de óptica biomédica 12 (6): 064002. Bibcode:2007JBO... 12f4002K. doi:10.1117/1.2804926. PMID18163818.
  2. ^ Etienne Cuche; Frédéric Bevilacqua y Christian Depeursinge (1999). "Holografía digital para la proyección de imagen de contraste de fase cuantitativo". Letras de la óptica 24 (5): 291 – 293. Bibcode:1999OptL... 24..291 C. doi:10.1364/OL.24.000291.
  3. ^ Pierre Marquet; Benjamin Rappaz, Pierre J. Magistretti, Etienne Cuche, Yves Emery, Tristan Colomb y Christian Depeursinge (2005). "Microscopia holográfica digital: un contraste no invasivo de imagen técnica que permite la visualización cuantitativa de células vivas con exactitud axial subwavelength". Letras de la óptica 30 (5): 468 – 470. Bibcode:2005OptL... 30..468M. doi:10.1364/OL.30.000468.
  4. ^ Marrison, Joanne; Räty, Marriott, o ' Toole (06 de agosto de 2013). «Ptychography – una etiqueta libre, high-contrast imaging técnica para células vivas usando cuantitativa fase información». Informes científicos de la naturaleza 3 (2369). Bibcode:2013NatSR... 3E2369M. doi:10.1038/srep02369.
  5. ^ a b "Proyección de imagen de 4Deep en elagua".
  6. ^ Myung K. Kim (2010). Principios y técnicas de la microscopia holográfica digital. Comentarios SPIE 1:: 018005. Bibcode:2010SPIER... 1a8005K. doi:10.1117/6.0000006.
  7. ^ "El microscopio de contraste de fase". Nobel Media AB.
  8. ^ Popescu, G.; Ikeda, T.; Dasari, r. r.; Feld, M. S. (2006). "Microscopía de fase de difracción para cuantificar la dinámica y estructura de la célula". Letras de la óptica 31 (6): 775-777. doi:10.1364/OL.31.000775. PMID16544620.editar
  9. ^ «Microscopio imágenes de contraste de fase cuantitativa - etiqueta-libre vivir análisis y proyección de imagen de la célula». Fase de Holographic Imaging AB.
  10. ^ "Sistemas de proyección de imagen de Ovizio".

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