Reacción en cadena jerarquizada de polimerasa

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Un diagrama que ilustra el método de PCR anidada.

Reacción en cadena jerarquizada de polimerasa (PCR anidada) es una modificación de reacción en cadena de polimerasa pretende reducir la fijación no específica en los productos debido a la amplificación de los sitios de unión del primer inesperado.

Reacción en cadena de polimerasa es el proceso utilizado para amplificar DNA muestras, vía temperatura-mediadas Polimerasa de la DNA. Los productos pueden ser utilizados para secuencia o análisis y este proceso es una parte clave de muchos genética laboratorios de investigación junto con aplicaciones en Dermatoglifia del ADN para medicina forense y otros casos genéticas humanas. PCR convencional requiere cartillas de complementarios a los términos del ADN diana. Un problema que comúnmente ocurren es primers vinculante a regiones incorrectas de la DNA, dando productos inesperados.

La reacción en cadena jerarquizada de polimerasa consiste en dos sistemas de cartillas, utilizados en dos tramos sucesivos de reacción en cadena de polimerasa, el segundo conjunto destinado a ampliar un objetivo secundario en el primer producto de la ejecución.

Procesos de

  1. El ADN diana somete a la primera carrera de la reacción en cadena de polimerasa con la primera serie de cartillas, que se muestra en verde. La selección de sitios de unión del primer similar y alternativa ofrece una selección de productos, sólo uno que contenga la secuencia prevista.
  2. El producto de la primera reacción somete a una segunda carrera con el segundo conjunto de cartillas, que se muestra en rojo. Es muy poco probable que cualquiera de los productos PCR no deseados contienen sitios de Unión para ambos los cebadores nuevos, garantizando que el producto de la segunda PCR tiene poca contaminación de productos no deseados de dímeros de primer, horquillas y secuencias diana primer alternativa.

Recursos

Libros en su biblioteca local sobre las reacciones en cadena jerarquizada de polimerasa
Artículos académicos sobre las reacciones en cadena jerarquizada de polimerasa

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