Tinción de Feulgen
Tinción de Feulgen es un la coloración técnica descubierta por Robert Feulgen y utilizado en la histología para identificar material cromosómico o DNA en las muestras de células. Depende de ácido hidrólisis de ADN, fijación, por tanto, agentes con ácidos fuertes debe evitarse.
La muestra se somete a caliente (60 ° C) ácido clorhídrico, entonces a Reactivo de Schiff. En el pasado, un sulfito de enjuague seguido, pero esto ahora se considera innecesario. Opcionalmente, la muestra puede ser contratinción con Ligero color amarillento verde SF. Por último, está deshidratado con etanol, con xilenoy montado en un resinoso medio.
ADN debe ser teñido rojo. El fondo, si contratinción, es verde.
La reacción de Feulgen es una técnica semicuantitativa. Si los aldehinos sólo permanecen en la célula son aquellos producidos desde la hidrólisis de ADN, entonces la técnica es cuantitativa para el ADN. Es posible utilizar un instrumento conocido como un microdensitometer o microspectrophotometer para realmente medir la intensidad de la reacción de Feulgen rosa para un determinado orgánulo. Mediante este procedimiento, que fue pronto determinaron que las células de la interfase fueron compuestas de dos poblaciones, los diploide ADN y los tetraploide ADN (dos genomas completos). Los núcleos parecía idénticos, pero uno contiene dos veces más ADN. Esto dio lugar a la división del período de interfase de la ciclo celular a las fases G1, S y G2, basadas en la síntesis de ese ADN extra.[1]
Referencias
- ^ El procedimiento de Feulgen para ADN, Adolphus College